首页 > 威廉希尔中文网 > 威廉希尔中文网专题 > 人参皂苷Rh2专题 > 人参皂苷Rh2与威廉希尔 > 人参皂苷Rh2免疫调节研究

人参皂苷Rh2增强紫杉醇诱导Hela(宫颈癌)细胞的凋亡

  焦玉莲1,王强修1,李建峰1,王振华2

  1.山东省立医院(中心实验室:焦玉莲;病理科:王强修,李建峰),山东济南250021

  2.石河子大学药学院省部共建教育部新疆特种植物药资源重点实验室,新疆石河子832002

  摘要

  目的:探讨人参皂苷Rh2能否增强紫杉醇诱导Hela细胞的凋亡。

  方法:应用SRB法检测药物抑威廉希尔效应;荧光染色和流式细胞仪检测细胞凋亡;应用金氏公式分析药物间的相互作用。

  结果:人参皂苷Rh2可浓度依赖性地抑制Hela细胞的增殖,并可协同性地增强紫杉醇对细胞增殖的抑制作用;人参皂苷Rh2可协同性地增强紫杉醇诱导的Hela细胞凋亡,并具有浓度依赖性。

  结论:人参皂苷Rh2可协同性地增强紫杉醇对Hela细胞增殖抑制作用和诱导凋亡作用。

  中华威廉希尔防治杂志,2006,13(21):1623-1626

  子宫颈癌是常见的妇科恶性威廉希尔之一。近年来,随着威廉希尔化学治疗研究的迅速发展,紫杉醇被逐步应用于宫颈癌的同步放化疗或辅助治疗,获得了理想的效果[1]。但对于晚期已转移或复发的宫颈癌患者而言,目前的治疗仍未有较大进展。研究表明,人参皂苷Rh2可以诱导威廉希尔细胞再分化和凋亡[2,3]。我们利用体外培养的Hela细胞系,探讨了人参皂苷Rh2和紫杉醇单用或联用对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响。

  1:(实验过程略)

  2结果

  2.1紫杉醇和人参皂苷Rh2对Hela细胞增殖的抑制作用

  人参皂苷Rh2可浓度依赖性地抑制Hela细胞的增殖,抑制曲线呈典型S型曲线,IC50为(49.28%2.39)g/mL(图1)。

  紫杉醇单独应用或与10、20和40ug/mL的人参皂苷Rh2联合应用对Hela细胞增殖抑制曲线见图2。

  表明紫杉醇浓度依赖性的抑制了Hela细胞的增殖,IC50为(0.015%0.001)g/mL。10、20和40g/mL的人参皂苷Rh2与紫杉醇联合应用,可明显增强紫杉醇对Hela细胞增殖的抑制作用,使紫杉醇的IC50下降为(0.0094%0.001)、(0.0055%0.0004)和(0.0043%0.0003)ug/mL。根据金氏计算公式计算各浓度联合用药q值,结果q值均>1,表明人参皂苷Rh2和紫杉醇联合应用对Hela细胞增殖的抑制有协同作用。

  2.2人参皂苷Rh2促进紫杉醇诱导Hela细胞的凋亡

  利用AO和EB双染进行荧光观察。0.02ug/mL紫杉醇和20ug/mL人参皂苷Rh2处理48h后均可见到少量早期凋亡细胞,而两者联合处理后,凋亡细胞数量明显增多,且有较多晚期凋亡细胞出现。流式细胞术测定结果表明,紫杉醇和人参皂苷Rh2均剂量依赖性地诱导了Hela细胞凋亡的发生,紫杉醇和人参皂苷Rh2联合应用,细胞凋亡比率明显升高。根据金氏公式计算的q值表明,10、20和40ug/mL人参皂苷Rh2和0.02ug/mL紫杉醇联合应用诱导的He-la细胞凋亡有协同增效作用(表1)。

  3讨论

  人参作为传统中药在中国的应用已有数千年的历史,具有广泛的药理活性。人参皂苷是人参的主要有效成分之一,人参中多种天然存在的人参皂苷如Rb1、Rg3均可在肠道菌群的代谢下产生Rh2进入循环系统[8,9]。紫杉醇是一种通过抑制微管蛋白解聚,阻滞细胞周期于G2/M期,从而导致癌细胞死亡的广谱抗威廉希尔药物,临床上以单药或与其他化疗药联合应用对多数实体瘤有效。

  Yim等[10]的研究表明,人参皂苷Rh2和紫杉醇均可以通过caspase??3裂解CDC6蛋白诱导Hela细胞发生凋亡。CDC6是DNA复制起始和延伸的首要因子,是形成前复制复合物的主要成分,是确保细胞在一个细胞周期中只复制一次的重要因子,威廉希尔细胞中存在高表达的CDC6蛋白。这表明人参皂苷Rh2和紫杉醇可能通过一条共同的信号通路诱导Hela细胞凋亡,有可能是两者具有协同作用的基础。

  Mo等[11]的研究发现,紫杉醇可诱导威廉希尔细胞端粒缩短并发生凋亡,抑制端粒酶活性,可明显增强紫杉醇诱导威廉希尔细胞的凋亡。曾小莉等[12]的研究表明,人参皂苷Rh220g/mL时可明显抑制肝癌细胞端粒酶活性,并诱导了肝癌细胞的再分化;而Hela细胞为端粒酶阳性细胞。因此,人参皂苷Rh2对端粒酶活性的影响也有可能是其增强紫杉醇诱导的Hela细胞凋亡的机制之一。

  我们的研究表明,人参皂苷Rh2可剂量依赖性地抑制Hela细胞增殖,诱导Hela细胞凋亡,并可明显促进紫杉醇对Hela细胞增殖的抑制作用。荧光显微镜形态学观察和流式细胞测定结果表明,人参皂苷Rh2促进了紫杉醇诱导Hela细胞的凋亡。

  我们的研究虽在细胞水平揭示了人参皂苷Rh2可协同促进紫杉醇对Hela细胞增殖抑制和诱导凋亡作用,但具体分子机制和体内的作用仍需进一步研究。人参皂苷Rh2本身具有一定的抗威廉希尔活性和免疫调节作用,且具有增强紫杉醇活性的作用,如能应用于临床,有可能使宫颈癌患者受益。

  参考文献

  [1]TambaroR,ScambiaG,DiMaioM,etal.Theroleofchemotherapyinlocallyadvanced,metastaticandrecurrentcervicalcancer[J].CritRevOncolHematol,2004,52(1):33-44.

  [2]KimYS,KimDS,KimSI.GinsenosideRh2andRh3inducedifferentiationofHL-60cellsintogranulocytes:modulationofproteinkinaseCisoformsduringdifferentiationbyginsenosideRh2[J].IntJBiochemCellBiol,1998,30(3):327-338.

  [3]KimYS,JinSH.GinsenosideRh2inducesapoptosisviaactivationofcaspase-1and3andupregulationofBaxinhumanneuroblastoma[J].ArchPharmRes,2004,27:834-839.

  [4]SkehanP,StrorengR,ScudieroD,etal.Newcolorimetriccytotoxicityassayforanticancerdrugscreening[J].JNatlCancerInst,1990,82:1107-1112.

  [5]RibbleD,GoldsteinNB,NorrisDA,etal.Asimpletechniqueforquantifyingapoptosisin96wellplates[J].BMCBiotechnol,2005,10,5:12.

  [6]魏亚明,白海,欧英贤,等.As2O3诱导白血病细胞凋亡过程中Ca2+的变化及其调节[J].威廉希尔,2004,24(6):546-549.

  [7]金正均.合并用药中的相加[J].中国药理学报,1980,1:70-76.

  [8]陈昕,周秋丽,王本祥,人参皂甙Rb1的肠内菌代谢[J].药学学报,1999,34(6):410-414.

  [9]BaeEA,HanMJ,ChooMK,etal.Metabolismof20(S)and20(R)ginsenosideRg3byhumanintestinalbacteriaanditsrelationtoinvitrobiologicalactivities[J].BiolPharmBull,2002,25(1):58-63.

  [10]YimH,JinYH,ParkBD,etal.Caspase-3mediatedcleavageofCdc6inducesnuclearlocalizationofp49??truncatedCdc6andapoptosis[J].MolBiolCell,2003,14(10):4250-4259.

  [11]MoY,GanY,SongS,etal.Simultaneoustargetingoftelomeresandtelomeraseasacancertherapeuticapproach[J].CancerRes,2003,63(3):579-585.

  [12]曾小莉,涂植光.端粒酶在人参皂甙Rh2诱导肝癌细胞分化中的作用[J].威廉希尔中文网,2004,23(12):1655-1659.

  收稿日期:2006-03-20修回日期:2006-07-04

更多>>威廉希尔防治问答